检测还原糖、脂肪和蛋白质实验总结

检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质实验理论知识

1．检测用到的实验原理
可溶性糖中的还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖），与斐林试剂发生作用，可以生成砖红色的沉淀。脂肪可以被苏丹III染成橘黄色。蛋白质与双缩脲试剂发生作用，可以产生紫色反应。因此，可以根据与某些化学试剂所产生的颜色反应，鉴定生物组织中糖、脂肪或蛋白质的存在。
2．实验材料用具、实验方法步骤
实验材料
①做可溶性还原糖的鉴定实验，应选择含糖量较高、颜色为白色或近于白色的植物组织（如苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等）
②做脂肪的鉴定实验，应选择富含脂肪的种子，以花生种子为最佳，实验前需浸泡3-4h。
③做蛋白质的鉴定实验，可用鸡蛋蛋白或用浸泡1-2d的黄豆种子（或豆浆）。

检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质的步骤

① 还原糖的鉴定方法
（1）取A、B编号的2支试管，分别注入2ml组织样液和2ml蒸馏水。
  （2）向2支试管内分别加入5—6滴斐林试剂。振荡试管，使溶液混合均匀，此时溶液呈蓝色。
  （3）将2支试管放进盛有开水的大烧杯中，用酒精灯加热煮沸2min左右。在对试管加热煮沸过程中，随时仔细观察并对比2支试管中溶液的颜色变化。
②脂肪的鉴定方法
（1）用镊子取少许泥状花生种子组织于载玻片上，滴2-3滴苏丹III染液，染色2-3min。
      （2）用吸水纸吸去组织周围的染液，再滴上2滴体积分数为20%的酒精溶液，洗去浮色。
      （3）用吸水纸吸去组织周围的酒精，再滴上1-2滴蒸馏水，盖上盖玻片，压片制成临时装片。
      （4）在低倍镜下寻找组织附近已着色的圆形小颗粒。为了观察得更清楚，可以用高倍镜进行观察
③蛋白质的鉴定方法
（1）取2支试管，分别向2支试管加入豆浆和蒸馏水各2ml，再分别向2支试管中加入2ml双缩脲试剂A，摇荡均匀，注意观察溶液的颜色变化。
（2）再向2支试管加入3-5滴双缩脲试剂B摇匀，注意观察溶液的颜色变化。